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4in1 shRNA克隆案例分享

胃癌是侵袭性极强的恶性肿瘤之一，早期诊断率低，转移率高。尽管胃癌在治疗方面已经取得了一定的进展，但为了寻求更佳的治疗手段，需要更好地了解其潜在发病机制和新的治疗靶点。驱动蛋白超家族23基因（KIF23），在细胞质分离、轴突生长等多种细胞过程中发挥重要作用。目前，KIF23已被发现在多种肿瘤组织和细胞中高表达，提示KIF23与肿瘤发生有潜在的联系。在本篇研究，作者发现KIF23的表达与胃癌的不良预后相关，且与肿瘤分期（pTNM）有关。体外实验证明，KIF23的缺失对胃癌细胞的增殖有明显的抑制作用。此外，KIF23基因敲除可显著抑制小鼠胃癌细胞的增殖，并显著下调肿瘤细胞增殖因子Ki67和PCNA的表达。综上所述，这些数据表明KIF23可能是胃癌的一个潜在治疗靶点。

02

shRNA腺病毒案例分享

据报道，跨膜蛋白173（TMEM173）重组蛋白能参与内质网应激、炎症和免疫过程，这些过程都与心肌肥大密切相关。TMEM173和自噬之间有密切而复杂的联系，但它在自噬中的具体作用还有待进一步研究。在本文中，作者发现与野生型C57BL/6小鼠相比，Tmem173基因敲除（KO）的小鼠在横向主动脉缩窄（TAC）6周后表现出更严重的肥大、纤维化、炎性浸润和心脏功能障碍。透射电镜和蛋白质水平显示KO小鼠心肌自噬小体降解受到抑制。另外，苯肾上腺素处理的乳鼠心肌细胞的体外实验表明，Tmem173基因的丰度与Lc3-Ⅱ的丰度和反映自噬体降解能力的红色和黄色荧光点数呈负相关。这些结果表明，TMEM173可以改善自噬通量，并对压力超负荷所致的心肌肥厚具有保护作用，暗示其可能成为未来治疗心肌肥厚的潜在靶点。

Tmem173下调对体外PE诱导的心肌细胞肥大的影响

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03

4in1 shRNA腺病毒案例分享

敲低PFKFB3的表达可降低成熟破骨细胞的数量大小且损坏F-肌动蛋白环

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04

4in1 shRNA慢病毒案例分享

在多种乳腺癌细胞中敲低USP14的表达

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05

mir30-based shRNA AAV案例分享

06

诱导性shRNA AAV案例分享

伏隔核神经元cAMP调控血脑屏障完整性和抑郁敏感性

中国药科大学的研究人员通过代谢组学分析等手段对压力应激诱导抑郁的小鼠模型进行研究，发现cAMP在NAC中特异性降低，并与抑郁程度呈正相关，在NAC中补充cAMP可以改善BBB的完整性和抑郁样行为。RNA-Seq分析发现，cAMP下降主要是因为其合成酶Adcy5受抑制，且此过程只发生在神经元细胞中。通过降低NAc中Adcy5的表达，内源性调节神经元内cAMP合成，可调节对社会应激的敏感性。此外，NAc脑区cAMP不足降低了胞外基质蛋白reelin的表达，外源补充后促进了BBB完整性，并改善了抑郁样行为。上述结果表明，神经元cAMP可能通过Reelin介导的细胞外基质信号调节NAC血脑屏障完整性的分子机制，为抑郁症的防治提供了新思路。

伏隔核内神经元CAMP合成内源性调节后的行为变化

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