基因过表达效果检测

研究基因的表达与功能时，科研工作者首先需要将外源DNA导入细胞/组织中。DNA的体内外递送需要用到运输工具-载体，而质粒和病毒是两种常用的基因递送载体。通过将目的基因克隆至相应的表达载体，利用细胞转染或者病毒感染的方式实现外源基因的过表达。外源基因的过表达效果如何是科研工作者非常关心的问题。维真生物可以采用常规分子生物学技术揭示结果。

维真生物可为客户提供基因转录水平和翻译水平的基因表达检测服务，具体信息详见下表；

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相关服务： 分子克隆 腺病毒包装 慢病毒包装 腺相关病毒包装 稳定细胞株建立

实时定量PCR是定量分析mRNA最通用、最快速和最简便的方法。该方法利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对待测样品进行定量分析，具有很高的灵敏性和特异性。目前，实时定量PCR常用的为荧光染料嵌合法(SYBR Green)和荧光探针法。其中，荧光染料嵌合法(SYBR Green)是最经济、最简便的，它利用荧光染料(SYBR Green)与双链DNA分子结合发光的特性，指示PCR扩增产物的增加，从而揭示基因转录水平的表达特征。

Western blot，也称免疫印迹，是利用抗原与抗体特异性结合的原理检测外源基因表达的特异蛋白质。经过PAGE胶分离的蛋白质样品，转移到固相支持物（如硝酸纤维素膜、PVDF膜）上，固相支持物以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相支持物上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的二抗起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异目的基因表达的蛋白质。该技术被广泛应用于定性和半定量分析蛋白表达水平，从而揭示基因翻译水平的表达特征。

	质粒转染试剂说明书