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质粒转染试剂



一、产品简介:

中文名称: 质粒转染试剂 英文名称:VGF
产品货号: FH880806 规格:浓度1 µg/ µL;体积100ul / 750ul / 1.5ml
保质期:18个月 储存条件: 2-8℃ ,切勿放-20℃


二、产品概述:

VGF是一种多聚阳离子聚合物,具有较高的阳离子电荷密度使得聚合物网络在任何 pH下都能充当有效的“质子海绵”(proton sponge)体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞,其效果好于脂质聚酰胺,经进一步的改性后,其转染性能好于树枝状聚合物,而且它的细胞毒性低。


三、使用方法:

大部分细胞系所使用的DNA(µg)与VGF(µg)的比值为1:3或 1:4,转染状态良好的细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。下面以24孔板培养的哺乳动物细胞为例:

3.1 贴壁细胞:转染前一天每孔0.5-2×10E5个细胞接种于 500 µL培养基中,在转染时细胞可长至90-95%汇合度。

悬浮细胞:在配制转染液前每孔4-8×10E5个细胞接种于500 µL培养基中。

3.2 转染液制备,每孔细胞用量如下:

A. 用50 µL DMEM培养基 (或其他无血清培养基) 稀释质粒DNA,轻轻混匀。

B. 取适量VGF在50µL DMEM培养基中稀释,室温孵育5min。

C. 将前两步所稀释的DNA和VGF混合,轻轻混匀,室温放置30min。

3.3 在每孔细胞中加入混合后的转染液,轻轻摇匀。

3.4 贴壁细胞可在转染4-6h后可更换培养基,悬浮细胞可在转染后的18-48h之间,对细胞进行换液。转染18-48h之后可检测基因表达。如果检测蛋白表达, 请在转染后24-72h收集细胞样品。

3.5 对于稳定转染,在转染24h后以1:10传代培养,第二天可加入选择培养基。


四、VGF与其他转染试剂的效果:



产品说明书(点击下载)


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