产品

病毒包装

克隆服务

附加服务

技术资源

关于维真

当前位置:首页 > 产品 > CAR T产品

维真生物 sgRNA文库


基因敲除是实现功能缺失型筛选的重要手段,已被广泛应用于靶向药物研究、抗性基因筛选、基因功能研究、基因组转录激活研究及蛋白质运输及定位等方向。

目前已经广泛应用的RNAi技术的靶标是mRNA,而CRISPR通过RNA识别DNA序列然后再改变DNA序列,是可以遗传的。由于编码mRNA的DNA序列只占总DNA的极少部分,因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多,更有可能筛选出针对某DNA序列的特异CRISPR靶标。

在CRISPR/Cas9系统中,sgRNA 与 Cas9 核酸内切酶的复合物能在目的片段生成DNA双链断裂(double-strand breaks,DSBs),诱发由非同源末端连接(NHEJ)修复机制造成的移码突变。CRISPR/Cas9系统可同时沉默多个基因,并具有十分广泛地应用范围,已报道成功应用于细菌、酵母菌、植物、鱼类和哺乳动物中。目前,更加便捷高效的CRISPR sgRNA 文库已逐渐取代 shRNA 文库。

维真生物的人源基因sgRNA慢病毒文库及小鼠基因sgRNA AAV文库配合维真提供的Cas9稳定表达细胞系,将助您在更短的时间内实现高通量筛选!


一、 维真生物 sgRNA文库相关产品及服务


1. sgRNA质粒/病毒

文库名称

靶向基因名称及数量

sgRNA数量

病毒滴度

人源基因sgRNA
慢病毒文库

人源基因 19114个

76441

1×108IU/mL

激酶基因 763

3052

1×108IU/mL

小鼠基因sgRNA
慢病毒文库

小鼠基因 20611个

130209个

1×108IU/mL


sgRNA AAV载体图谱


2. Cas9稳转株

细胞名称

来源

稳定表达基因

HEK293

Cas9

Neuro-2A

小鼠



3. Cas9稳转株构建服务

维真生物可根据您实验所需,针对您实验目的细胞,构建Cas9稳转株。详情可联系销售人员。



二、 维真生物 Cas9的活性检测


Cas9的活性检测,可以通过Cas9质粒转染细胞后观察测序结果中的套峰来实现。

Cas9会在识别位点造成DNA双链断裂,断裂处通过易错修复,易造成随机突变。正因如此,通过识别位点上下游引物进行PCR后,产物实为两类PCR产物的混合物,分别是原本序列的PCR产物和突变序列的PCR产物。通过对PCR产物进行测序,将会出现套峰样结果,表明Cas9为有活性的。如未观察到套峰,表明Cas9没有活性或活性极低。


Cas9活性检测结果(测序出现套峰样结果)



三、sgRNA文库高通量筛选技术及其优势

SgRNA 文库高通量筛选技术,指的是利用sgRNA质粒/病毒文库,感染cas9稳定表达细胞系,进而达到高通量筛选的目的。


SgRNA文库高通量筛选技术



相比传统shRNA文库,sgRNA文库具有无可比拟的优势。不仅在操作上节约时间成本,还具有更广泛的应用范围和更卓越的修饰效果。


SgRNA文库高通量筛选技术的优势


试用装免费申请

备案号:鲁ICP备13011878号-4    网址:www.wzbio.com.cn

丨免费试用装丨