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服务上新丨维真AAV中和抗体检测服务

服务上新丨维真AAV中和抗体检测服务

背景介绍


AAV由于高组织特异性、良好的扩散性、低免疫原性、高安全性和稳定性等特点,已经成为科研和基因治疗中极具市场前景的病毒载体之一。AAV衣壳蛋白种类丰富,其中2型和9型AAV作为基因疗法中的病毒载体研究较多,且已经应用于临床。目前,基于AAV2载体的Luxturna(Spark Therapeutics公司开发,用于治疗Leber先天性黑蒙2型)以及基于AAV9载体的Zolgensma(诺华公司开发,用于治疗脊髓性肌萎缩症)已获批在患者身上使用,并显现出较好的治疗效果。

然而针对AAV衣壳的中和抗体在大多数试验动物和人群中普遍存在,当载体进入血液中时中和抗体可阻断AAV转导。尤其是当AAV应用于基因治疗时,体内预存的抗AAV的中和抗体会降低基因转导的效率,这大大限制了AAV的应用。因此,为提高AAV治疗的有效性,提前检测受试者或动物体内是否存在AAV中和抗体十分必要,对临床或临床前试验中AAV血清型的适用性具有指导意义。

预存中和抗体大大降低基因转导效率

检测方法


维真生物利用荧光素酶报告系统在体外进行AAV中和抗体的检测,可以检测待测样本中是否有特定血清型的中和抗体,以方便客户选择不同的动物模型或者不同血清型的AAV。通过检测Luciferase发光值RLU,根据发光值计算待检样本中抗AAV病毒的中和抗体是否存在,判断血清/抗体对该血清型的AAV病毒是否具有中和活性。

如果受试样品中预存大量抗AAV的中和抗体,那就说明,需要更大剂量的AAV才能起到较好的基因转导效果,那么此种血清型对该动物体来说并非理想选择,需要更换AAV血清型或者动物模型进行下一步的研究或者临床试验。

中和抗体检测服务项目


一、服务项目

AAV中和抗体检测服务

二、服务类型

定性检测、定量检测

三、待测样本

① 血清样本,干冰运输;

② 体积:≥200μL;

③ 要求:无菌,乙肝、丙肝、HIV、梅毒、EB、CMV检测阴性;

四、服务流程

确定检测方案 → 签订合同 → 寄送待检样品 → 检测中和抗体 → 出具检测报告

五、服务周期

自收到待检样本起5个工作日

六、服务说明

可提供AAV2或AAV9中和抗体检测;

检测数据及报告仅对受试样本负责;

七、数据支持

  • AAV2-CMV-LUC中和抗体检测结果
  • AAV9-CMV-LUC中和抗体检测结果

检测步骤:

将待测样品按以下梯度进行稀释:30X、60X、120X、240X、 480X、960X,每个梯度取10uL分别与10uL不同血清型的AAV病毒共同孵育,孵育完成后将混合液感染293T细胞,感染24h后用酶标仪检测RLU发光值。综合以上,在血清1:60稀释时,无论AAV2还是AAV9抑制率均能接近100%。

八、服务优势

① 灵敏性高:在血清稀释240-480倍后仍可以检测出中和抗体;

② 特异性强:在无抗体的血清中,完全检测不到中和抗体;

③可重复性好:多次试验得到的数据之间差异极小。


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