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猴痘假病毒

SARS-CoV-2假病毒

自2022年5月以来,多国陆续发现猴痘病例,并迅速向全球蔓延。7月23日,世界卫生组织(WHO)宣布,猴痘疫情已构成“国际关注的突发公共卫生事件”,这是世卫组织针对全球突发公共卫生事件发出的最高级别警报。虽然,针对天花病毒的疫苗和药物为应对猴痘提供了选择,但目前尚没有针对MPV的特异性疫苗和特效药物。维真生物积极响应,开发出可用于MPV核酸检测试剂盒性能测试的假病毒系列产品,助力猴痘致病机理及防治等相关研究。

1. 产品简介


维真生物基于全面的病毒包装平台和稳定的生产工艺,将Monkeypox Virus (MPV)特异性靶标序列F3L和包膜蛋白B6R的基因序列,分别克隆构建至慢病毒,腺病毒和腺相关病毒(AAV)载体上,成功开发出高质量的猴痘假病毒系列产品,并且具有良好的生物安全性和稳定性。

货号 名称 规格
MVLV10001 pLenti-Monkeypox Virus-B6R假病毒 ≥1*10E8TU/ml, 1ml
MVLV10002 pLenti-Monkeypox Virus-F3L假病毒 ≥1*10E8TU/ml,1ml
MVAD10001 pADM-Monkeypox Virus-B6R假病毒 ≥1*10E10pfu/ml,1ml
MVAD10002 pADM-Monkeypox Virus-F3L假病毒 ≥1*10E10pfu/ml, 1ml
MVAV10001 pAV-Monkeypox Virus-B6R假病毒 ≥5*10E12vg/ml,1ml
MVAV10002 pAV-Monkeypox Virus-F3L假病毒 ≥5*10E12vg/ml 1ml

*除上述F3L和B6R的载体和病毒产品外,我们还可以提供其他猴痘相关基因的载体构建与病毒包装定制服务,助力猴痘病毒的研究,欢迎各位老师垂询!


2. 产品用途


用于猴痘病毒核酸检测试剂盒的开发和性能评价,效果验证,作为qPCR实验的阳性标准品使用。

3. 研究背景


1.猴痘病毒简介

猴痘病毒(monkeypox virus,MPV) 属于痘病毒科正痘病毒属,同属的还有天花病毒、牛痘病毒和痘苗病毒。MPV是一种有包膜的线性双链DNA病毒,基因组大小约197kb,被包裹在直径为140-260nm多晶的哑铃形核内,病毒颗粒呈砖形或椭圆形。MPV基因组有一个高度保守的中央编码区,约56-120 kb,两侧是可变区域和末端重复序列。根据遗传、地理和表型变异,该病毒有两个不同的分支,即西非和刚果盆地,后者也被称为中非分支,毒性最强。通过全基因组测序已获知本次疫情传播的病毒属于较温和的西非分支。

彩色透射电子显微镜捕获的猴痘病毒颗粒 (来源英国《新科学家》杂志网站)

2.MPV感染症状

MPV引起的人类疾病症状与天花相似,但其致命性和传染性不如天花病毒。猴痘潜伏期为5-21天,最先是发热阶段,通常持续1至3天,症状包括发热、寒战、剧烈头痛、淋巴结肿大、背部疼痛、肌肉疼痛和疲劳至极。发热期过后是皮疹期,通常持续2-4周,患者先是面部出现皮疹,随后扩散到身体其他部位,皮疹病变由斑疹(基底扁平)演变为丘疹(隆起、坚硬、疼痛)、小泡(充满透明液体)、脓疱(充满脓液),最后是结痂。根据感染MPV的分支和医疗情况,MPV致死率为0~11%,幼儿死亡率更高。

MPV感染症状 (Narendra Kumar, Journal of Autoimmunity. 2022)

3.MPV入侵细胞机制

与多数DNA病毒不同,MPV在受感染细胞的细胞质内复制,而非细胞核内。MPV复制过程中产生两种感染性病毒颗粒:细胞内成熟病毒(MV)和细胞外包膜病毒(EV),其中,MV通过微胞饮或膜融合进入细胞,而EV通过膜融合进入。MV外有一层脂蛋白包膜,包裹病毒核心和包含蛋白质的侧体,在外界环境中相对稳定,主要参与介导宿主之间的传播;EV由脂质膜包裹MV外周形成,它来源于高尔基体或核内体。在胞质内完成病毒DNA的复制和病毒蛋白的组装后,MV经细胞裂解被释放,而EV则通过胞吐作用离开细胞。

值得注意的是,MPV的复制,转录,组装和释放过程由多个不同的蛋白质参与。

MPV的生命周期 (Narendra Kumar, Journal of Autoimmunity. 2022)

4.MPV传播途径

猴痘是一种人畜共患病,即一种由动物传播给人类的疾病。目前,MPV的宿主仍不清楚,非洲的啮齿动物可能参与了MPV感染传播。MPV可通过接触受感染动物的体液、病变皮肤或内部粘膜、呼吸道飞沫或受感染物品进行传播。

5.MPV检测方法

由于MPV感染的临床表现难以与其他痘病毒引起的疾病区分。因此,快速有效的实验室检测方法对控制MPV的暴发流行至关重要。

①PCR

PCR技术是检测猴痘病毒DNA的首选方法。一般来说,通常选择胞外包膜蛋白基因(B6R)、DNA聚合酶基因E9L,DNA依赖的RNA聚合酶亚基18 (RPO18)基因以及补体结合蛋白C3L、F3L和N3R基因的保守区域作为PCR扩增的靶标。PCR诊断标本可直接来自皮疹——皮肤、液体或痂皮。此外,重组酶聚合酶扩增(RPA)、环介导等温扩增(LAMP)技术和限制性长度片段多态性(RFLP) 技术也已被开发用于MPV DNA 检测。

②血清学实验

酶联免疫吸附试验(ELISA)可检测患者血清中的特异性IgM和IgG 抗体。由于MPV与其他痘病毒之间存在抗原交叉反应,此方法特异性较低。

③电镜观察

可利用电镜观察病毒的形态特征,同样地,由于MPXV和其他痘病毒在形态上无法区分,该方法缺乏准确性。此外,电镜观察灵敏度不高且样品制备复杂,周期较长。

④其他方法

免疫化学分析和多重免疫荧光成像可用于MPV抗原检测。

6.MPV预防及治疗

大多数人类猴痘感染最初是由动物向人传播造成的,应避免接触患病或死亡的动物,同时避免与感染者或受污染物质密切接触。目前,还没有针对MPV感染的特异性疫苗和特异性药物。据报道,天花疫苗可对猴痘提供85%的免疫保护。目前,预防天花病毒和MPV的两种疫苗已获批准:第二代疫苗ACAM 2000和第三代疫苗IMVAMUNE。此外,抗天花病毒药物也可发挥一定的抗MPV作用。

用于预防和治疗人类痘病毒的候选疫苗和抗病毒药物 (Gong Q et al. Virologica Sinica. 2022)

参考来源


1、https://www.who.int/health-topics/monkeypox#tab=tab_1.

2、Kumar N, Acharya A, Gendelman HE, Byrareddy SN. The 2022 outbreak and the pathobiology of the monkeypox virus. J Autoimmun. 2022 Jul;131:102855. doi: 10.1016/j.jaut.2022.102855. Epub 2022 Jun 25. PMID: 35760647.

3、Gong Q, Wang C, Chuai X, Chiu S. Monkeypox virus: a re-emergent threat to humans. Virol Sin. 2022 Jul 9:S1995-820X(22)00120-1. doi: 10.1016/j.virs.2022.07.006. Epub ahead of print. PMID: 35820590.

4、Kabuga AI, El Zowalaty ME. A review of the monkeypox virus and a recent outbreak of skin rash disease in Nigeria. J Med Virol. 2019 Apr;91(4):533-540. doi: 10.1002/jmv.25348. Epub 2018 Nov 19. PMID: 30357851.

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