图1. lnc-AROD促进IAV复制

随后，作者验证了lnc-AROD在体内对IAV感染的调节作用。将AAV6-lnc-AROD通过鼻内给药方式实现了小鼠肺组织中lnc-AROD的高表达。随后，给予PBS或H1N1病毒，作者发现相比AAV-GFP组，给药AAV-lnc-AROD的小鼠肺中IAV病毒滴度和M mRNA表达水平更高，且在IAV感染期间体重减轻更多，感染后9天内死亡。此外，染色结果显示AAV-lnc-AROD小鼠肺部有明显病变，表现为淋巴细胞浸润更严重，肺泡空间减少，肺泡壁增厚，肺泡腔充满炎症细胞。这些结果表明lnc-AROD的表达促进了小鼠体内IAV的复制，并进一步增强其致病性。

进一步检测发现lnc-AROD的敲低显著增加了H1N1感染后免疫相关基因IFN-β、ISG15和MxA mRNA的表达水平，相反，lnc-AROD过表达则抑制上述基因的表达水平。此外，AAV-lnc-AROD显著降低了IAV感染小鼠体内干扰素刺激基因ISGs的表达，这些数据说明lnc-AROD是抗病毒先天免疫的负调节因子。机制研究中，作者通过荧光素酶报告等实验数据发现lnc-AROD与miR-324-5p存在相互作用，并且miR-324-5p作用于靶基因CUEDC2，CUEDC2负调控先天免疫。进一步分析发现CUEDC2与lnc-AROD的表达呈正相关，并且miR-324-5p可以抑制lnc-AROD促进的CUEDC2表达上调，说明lnc-AROD通过与miR-324-5p结合，在调节CUEDC2表达中发挥ceRNA作用。

图3. lnc-AROD通过miR-324-5p-CUEDC2轴促进IAV复制